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酶標(biāo)儀的介紹及用途
更新時(shí)間:2016-05-27   點(diǎn)擊次數(shù):3159次

    酶標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的儀器又稱(chēng)微孔板檢測(cè)器??珊?jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)2大類(lèi),但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來(lái)進(jìn)行分析。 測(cè)定一般要求測(cè)試液的較為終體積在250μL以下,用一般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試,因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。

         酶標(biāo)儀主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)反應(yīng)中檢測(cè)吸光度值,其用途主要應(yīng)用于ELISA試劑的測(cè)定,廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室,包括臨床實(shí)驗(yàn)室。 

         酶標(biāo)儀測(cè)定原理是:在特定波長(zhǎng)下,檢測(cè)被測(cè)物的吸光值。 



         檢測(cè)單位: 
         光通過(guò)被檢測(cè)物,前后的能量差異即是被檢測(cè)物吸收掉的能量,特定波長(zhǎng)下,同一種被檢測(cè)物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。 
          檢測(cè)單位用OD值表示, OD是optical delnsity(光密度)的縮寫(xiě),表示被檢測(cè)物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans為檢測(cè)物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強(qiáng)度成下述關(guān)系: 
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度, Ι0 為在檢測(cè)物之前的光強(qiáng)度,Ι為從被檢測(cè)物出來(lái)的光強(qiáng)度。 
OD值由下述公式計(jì)算: 
E=OD=C×D×E 
C為檢測(cè)物的濃度 
D為檢測(cè)物的厚度 
E為摩爾因子 
         在特定波長(zhǎng)下測(cè)定每一種物質(zhì)都有其特定的波長(zhǎng),在此波長(zhǎng)下,此物質(zhì)能夠吸收較為多的光能量。如果選擇其它的波長(zhǎng)段,就會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此,在測(cè)定檢測(cè)物時(shí),我們選擇特定的波長(zhǎng)進(jìn)行檢測(cè),稱(chēng)為測(cè)量波長(zhǎng)。 


         但是每一種物質(zhì)對(duì)光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們?cè)龠x取一個(gè)參照波長(zhǎng),以消除這個(gè)不準(zhǔn)確性。在參照波長(zhǎng)下,檢測(cè)物光的吸收較為小。檢測(cè)波長(zhǎng)和參照波長(zhǎng)的吸光值之差可以消除非特異性吸收。 

          一般使用到酶標(biāo)儀的主要是在食品安全藥物殘留快速檢測(cè)中,例如配合北京望爾生物技術(shù)有限公司的克倫特羅、氯霉素、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、磺胺類(lèi)、氟喹諾酮類(lèi)、鏈霉素、青霉素等殘留快速檢測(cè)ELISA試劑盒使用時(shí),一般使用酶標(biāo)儀來(lái)進(jìn)行定量檢測(cè)。

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